F Focar de infectii nosocomiale cu Klebsiella de infectii nosocomiale cu Klebsiella... Klebsiella pneumoniae : impactul clinic infectii oportuniste la pacientii imunocompromisi, diabet, alcoolism, pacienti cu dispozitive invazive, nou nascuti

  • Published on
    01-Feb-2018

  • View
    219

  • Download
    5

Transcript

FFocar de infectii nosocomiale cu Klebsiella pneumoniae la nou-nascuti: valoarea investigatiei microbiologice moleculare Brindusa-Elena Lixandru1, Codruta Romanita Usein1, Maria Condei1, Daniela Cristea1, Elena-Carmina Dragulescu1, Ileana Luminita Coldea1, Felicia Antohe2, Irina Codita1,3 1INCDMI Cantacuzino, Bucuresti2IBPC N. Simionescu, Bucuresti3UMF Carol Davila, BucurestiConferinta Nationala de Microbiologie si Epidemiologie , Bucuresti, 2013Klebsiella pneumoniae : introducere Klebsiella pneumoniae : introducere Caracteristici :> Enterobacteriaceae> Bacili Gram-negativi> Oxidaza-negativiAero-anaerobImobil Tractul digestiv al omului (30%) si al animalelor 3 subspecii: subsp. pneumoniae, ozenae, rhinoscleromatisTestarea sensibilitatii la antibiotice :Grupul 2 de Enterobacterii: producerea naturala de penicilinaza de nivel scazut (SHV-1 cromozomala) inhibata de acidul clavulanic si tazobactam Rezistenta naturala la: aminopeniciline (ampicilina, amoxicilina) carboxipeniiline (ticarcilina), ureidopeniciline (piperacilina)Fara rezistenta naturala la C1G, C2G, carbapeneme, aminoside, quinolone, TE, C, SXTKlebsiella pneumoniae : impactul clinicKlebsiella pneumoniae : impactul clinic infectii oportuniste la pacientii imunocompromisi, diabet, alcoolism, pacienti cu dispozitive invazive, nou nascuti Tractul urinar si respirator: cele mai frecvente situsuri de infectie Raspandire rapida prin mainile personalului medical A -2 a cauza a septicemiilor dupa E. coli Rata de mortalitate crescuta Focare cu tulpini rezistente (BLSE), diseminare clonalaConferinta Nationala de Microbiologie si Epidemiologie , Bucuresti, 2013Klebsiella pneumoniae: mecanisme de rezistenta la Klebsiella pneumoniae: mecanisme de rezistenta la beta-lactaminebeta-lactamine Producerea de -lactamaze: mecanismul principal de rezistenta la -lactamine la bacteriile Gram-negative. plasmide cu gene de rezistenta BLSE (beta-lactamaze cu spectru extins): Prima BLSE descrisa la o tulpina de K. pneumoniae (1983) BLSE derivate din penicilinze TEM, SHV, prin modificarea 1 sau 2 aa din situsul activ al enzimei Dupa 2000 CTX-M un grup nou BLSE cu raspandire modiala E. coli ++++, K pneumoniae, Salmonella typhimurium, Proteus mirabilis Cefalosporinaze plasmidice (ex: CMY-2): achizitia de gene de tip AmpC prin intermediul plasmidelor de la speciile natural producatoare (Enterobacter, Serratia, Morganella, Citrobacter freundii) Carbapenemaze: KPC+++, VIM,NDM, OXA-48Conferinta Nationala de Microbiologie si Epidemiologie , Bucuresti, 2013Obiectiv:Investigarea unor tulpini izolate dintr-un focar de infectii nosocomiale intr-o sectie de nou-nascuti Conferinta Nationala de Microbiologie si Epidemiologie , Bucuresti, 2013Material si metode 8 izolate clinice8 izolate clinice Provenienta Provenienta 2 nou- nascuti 2 nou- nascuti Prelevate clinice: Prelevate clinice: Hemocultura Hemocultura Secretie pulmonara/traheobronsicaSecretie pulmonara/traheobronsica Secretie nazalaSecretie nazala Exsudat faringian Exsudat faringian Conferinta Nationala de Microbiologie si Epidemiologie , Bucuresti, 2013Material si metode Confirmare diagnosticConfirmare diagnosticMetode conventionale: teste biochimice in Metode conventionale: teste biochimice in househouseMetoda automata VITEKMetoda automata VITEK Testarea sensibilitatii la antibiotice:Testarea sensibilitatii la antibiotice:Metoda disc difuziei Kirby Bauer (CLSI): Metoda disc difuziei Kirby Bauer (CLSI): amoxilcilina, amoxicilina+ acid clavulanic, ticarcilina, piperacilina, piperaclina + tazobactam, cefalexin, cefuroxim, cefixim, cefotaxim, ceftazidim, aztreonam, ertapenem, imipenem, gentamicina, tobramicina, amikacina, acid nalidixic, ofloxacin, ciprofloxacin, tetraciclina, cloramfenicol, trimetoprim / sulfametoxazol Test de sinergie dublu-discTest de sinergie dublu-discDetectare gene prin PCR : Detectare gene prin PCR : blaCTX-MblaCTX-MblaTEMblaTEMblaSHVblaSHVMaterial si metodeTipizare : Metode fenotipice: Lizotipare Antibiotipare Metode moleculare: Electroforeza in camp pulsator (pulsed field gel electrophoresis = PFGE) a fragmentelor de ADN genomic obtinute cu enzima de restrictie XbaIRezultate - teste fenotipiceToate cele 8 tulpini au fost confirmate ca fiind K. pneumoniaeToate tulpinile au prezentat acelasi pattern de sensibilitate / rezistenta: R: AMX, TIC, PRL, CXM, KF, CTX, CN, SXT I: AMC, CFM, CAZ, NA S: TZP, IMP, ETP, ATM, AK, TOB, CIP, OFX, C, TEFenotip BLSE Toate tulpinile au fost lizorezistente (netipabile prin lizotipie)Rezultate - teste moleculareCTX grup1 (CTX-M-15++++?)SHV TEMRezultate PCR1 2 3 4 5 6 7 8 M+ 1 2 3 4 5 6 7 8 M+ 1 2 3 4 5 6 7 8 M+Legenda1-8 tulpini K. pneumoniae 9- martor pozitiv10martor negativ 11- apa12- marker greutate molecularaRezultate-teste moleculareLegenda:1,6,11-Salmonella ser..Braenderup H98122 - 5, 7 -10- tulpini K.pneumoniaeRezultate PFGESimilaritate 100% a profilurilor obtinute - clonalitatea si inrudirea epidemiologica a tulpinilor Concluzii Utilizarea metodelor fenotipce si moleculare a permis confirmarea unui focar de infectie nosocomiala care a evoluat intr-o sectie de reanimare nou-nascuti. Analiza PFGE reprezinta gold standard pentru demonstrarea clonalitatii tulpinilor din focarFocar de infectii nosocomiale cu Klebsiella pneumoniae la nou-nascuti: valoarea investigatiei microbiologice moleculare Slide 2 Klebsiella pneumoniae : impactul clinic Klebsiella pneumoniae: mecanisme de rezistenta la beta-lactamineObiectiv:Material si metodeSlide 7Slide 8Rezultate - teste fenotipiceRezultate - teste moleculareRezultate-teste moleculareConcluzii

Recommended

View more >