Microbiologie Curs-25 Geni Treponema.leptospira.borrelia

  • Published on
    14-Jul-2015

  • View
    215

  • Download
    0

Embed Size (px)

Transcript

<p>Curs XXV. Treponema, Leptospira, Borrelia Treponema pallidum 1. II. III. IV. V. VI. VII. VIII. IX. X. Minidefinitie Incadrare taxonomica Habitat Implicare in patologia umana Microbiologie - principalele caractere si implicatii in patogeneza si diagnosticul microbiologie Factori de patogenitate Patogenie Raspunsul imun Notiuni de epidemiologie si profilaxie Diagnostic</p> <p>Cuvinte cheie: spirochet, mobilitate, NECUL TIV ABIL, diagnostic serologie anticorpi netreponemici si anticorpi treponemici; sifilis primar, secundar, latent, teriar; tratament Penicilin; prevenie comportamental 1. Minidefiniie</p> <p>Treponema pallidum este o bacterie de forma spiralat, subire, cu alctuire a peretelui asemntoare bacteriilor Gram negative, necultivabil, agent etiologie al sifilisului. II. ncadrare taxonomic</p> <p> Regnum: Bacteria Philum: Spirochaetes</p> <p>Clasa: Spirochaetes</p> <p> Ordin : Spirochetales Familie: Spirochaetaceae</p> <p>III.</p> <p>Gen: Treponema Specie: pallidum Subspecie: pallidum Habitat Omul este singura sursa naturala a acestei bacterii.</p> <p>IV.</p> <p>Implicare n patologia uman Treponema pallidum este agentul etiologie al sifilisului. Sifilisul este o boal infecioas cu cale de transmitere predominent sexual.</p> <p>Multe dintre semnele i simptomele sifilisului sunt greu de difereniat de semnele i simptomele altor boli, motiv pentru care aceast boal este cunoscut i drept "Marele imitator" . Semnele i simpotomele de boal apar la 1-13 sptmni de la contactul infectant. Prima descriere a sifilisului n Europa dateaz din anul 1495, dar observaiile tiinifice apar n secolul al XIX-lea, cnd Alfred Fournier descrie leziunile anatomopatologice i diferitele stadii ale sifilisului. n 1906, Schaudinn i Hoffmann au descoperit agentul causal, Treponema pallidum, iar n 1907 Wassermann si Bordet au pus la punct o reacie serologic pentru punerea n eviden a anticorpi lor cardiolipinici. Sifilisul a fost tratat pentru prima oar cu success cu Penicilin n 1943, de ctre Mahoney, Arnold i Harris. n prezent, dup o perioad de declin, sifilisul recunoate din nou o tendin de cretere a numrului de cazuri, datorit creterii mobilitii populaiei i a modificrilor de comportament.</p> <p>v.</p> <p>Microbiologie - principalele caractere, implicaii n patogenez i diagnosticul microbiologie</p> <p>Treponema pallidum est o bacterie foarte subtire, cu dimensiunile de 0,3 urn / 8 15 um, de form helicoidal (Fig.l), mobil (rotatie constant n jurul axei), cu structur a peretelui asemntoare bacteriilor Gram negative. Treponema NU ESTE CULTI VABILA!!! Fig. 1. Treponema pallidum - forma helicoidal</p> <p>Treponema pallidum are o structur antigenic complex. Principalele antigene sunt: ~ Cardiolipidul sau haptena lipidica Wassermann (Fosfatidil-glicerol, comun treponemelor). mpreun cu proteina treponemic, cardiolipidul determin producerea de anticorpi numii reagine. ~ Antigen proteic specific de grup - se obine prin extracie din tulpina Reiter, nepatogen. Este un antigen comun treponemelor ~ Antigen poliozidic de grup - specific Treponemei pallidum, utilizat n reacia de imunofluorescen ~ Antigen somatie treponemic, specific Treponemei pallidum, utilizat n testul Nelson de imobilizare a treponemelor</p> <p>VI.</p> <p>Factori de patogenitate</p> <p>Proteinele membranei exteme au rol n aderena la celulele gazdei. Hialuronidaza, enzime litice i factorii care confer mobilitatea contribuie la penetrarea n celule i vasele sanguine. Bacteria poate rmne n stare de laten, intracelular, ani de zile, de unde n anumite circumstane pot disemina n alte regiuni anatomice. VII. Patogenie</p> <p>Cel mai frecvent, T pallidum ptrunde n organism prin membranele intacte sau Ieziuni minime cutanate, apoi ajunge rapid n circulaia limfatic i sanguin, provocnd o infecie sistemic. Intervalul ntre expunere i apariia primelor leziuni poate fi de 10 90 zile, cu o medie de 3 sptmni. n sifilisul congenital sau n sifilisul dobndit prin transfuzii de snge contaminat, treponemele ajung direct n circulaia sanguin. n toate stadiile bolii, este prezent endarterita, uneori obliterant, precum i infiltratul limfocitar. endarterita este ntreinut de interaciune a treponemelor cu moleculele de fibronectin prezente la nivelul organismului gazd. Uneori, vindecarea leziunilor alre loc cu formare de cicatrici. Sifilisul dobndit, necongenital recunoate 4 stadii. Sifilisul primar (ancru, adenopatie) apare la nivelul porii de intrare prin mucoase sau tegumente la interval de 10 - 90 zile (medie 3 sptmni) de la contactul cu persoana infectat poate fi unic sau multiplu leziunea este foarte contagioas are aspect de ulceraie cu margini dure, nedureroas (Fig. 2) exist posibilitatea de a nu fi observat ancrul se vindec spontan in 3-8 saptamani. Fig. 2. a i b - ancru sifilitic</p> <p>Sifilisul secundar (rozeole, sifilide papuloase) Manifestrile de sifilis secundar apar la 6-8 sptmni dup dispariia leziunii iniiale i pot include: ~ O erupie la nivelul palmelor i tlpi lor care dureaz 2-6 sptmni (Fig. 3, Fig. 4) ~ Cderea prului ~ Leziuni alb-cenuii la nivelul cavitii bucale i faringelui (Fig. 5) ~ Stare general proast Stadiul de sifilis secundar poate dura 3-6 luni, cu simptome care apar i dispar. Persoana infectat este contagioas n acest stadiu. Sifilisul ncepe s se generalizeze. Fig. 3. Sifilis secundar. Erupie la nivelul tlpilor i plantelor</p> <p>Fig. 4. Sifilis secundar. Sifilide la nivelul trunchiului</p> <p>Fig. 4. Sifilis secundar. Leziuni alb-cenuii la nivelul cavitii bucale</p> <p>\</p> <p>Sifilisullatent (mut clinic, stadiu criptic, ascuns) Sifilisul latent apare cnd dispar manifestrile sifilisului secundar. Bacteria se menine la nivel endotelial (Fig. 5) i ajunge la nivelul oaselor i mduvei osoase (Fig. 6), ganglionilor limfatici, organelor vitale i sistemului nervos central, fr manifestri zgomotoase. Stadiul latent poate s dureze 30 de zile sau intreaga via. Dintre cazurile netratate de sifilis secundar, 1/3 dezvolt sifilis tertiar. Fig. 5. Sifilis latent</p> <p>Fig. 6. Degenerare trofic a articulaiei genunchiului</p> <p>Sifilisul teriar (Ieziuni inflamatorii cronice ale sistemului cardiovascular i sistemului nervos) n acest stadiu, pacientul nu transmite infecia. Leziunile se dezvolt la nivelul pielii, oaselor si organelor vitale. La nivelul pielii apar formaiuni tumorale nedureroase, numite gome sifilitice (Fig. 7). Bacteriile invadeaz frecvent sistemul nervos n timpul stadiilor timpurii ale infeciei. Doar 3% - 7% dintre persoanele cu sifilis netratat vor dezvolta neurosifilis, o afectare sever a sistemului nervos. Sifilisul teriar se poate manifesta la 20 de ani dup infecia initial. Unele persoane cu sifilis nervos nu dezvolt simptome niciodat, n timp ce ali indivizi pot prezenta cefalee, redoarea cefei, uneori convulsii, febr, ca urmare a inflamaiei meningeale. Ca urmare a leziunilor vasculare se pot dezvolta simptome de accident vascular cu ameteal, slbiciune, probleme vizuale. Fig. 7 - Gom la nivelul fesei</p> <p>VIII.</p> <p>Raspunsul imun</p> <p>Leziunile din stadiul teriar al sifilisului sunt rezultatul unui rspuns de tip celular, ntrziat, la Tpallidum,. Acest rspuns, cu prezena limfocitelor T sensibilizate i macrofagelor poate avea ca rezultat formarea ulceraiilor i necrozei. Rspunsul imun de tip umoral are ca rezultat formarea anticorpilor treponemici i a reaginelor nespecifice. Imunitatea n sifilis nu este complet, n sensul c rspunsul umoral i celular pot impiedica apariia unei noi leziuni primare, dar nu sunt suficiente pentru ndepartarea treponemelor din organism. IX. Noiuni de epidemiologie i profilaxie</p> <p>Sifilisul este considerat o boal veneric al crei agent cauzal este Treponema pallidum. Transmiterea sifilisului are loc mai ales prin contact sexual, dar i de la mam la ft, sau prin transfuzii de snge infectat, sau ocazional prin leziuni cutanate expuse la</p> <p>contactul cu leziunile infecioase. Netratat, sifilisul poate parcurge cele 4 stadii: primar, secundar, latent i teriar, dar aceasta nu se ntmpl n toate cazurile. Localizarea cea mai frecventa a sancrului primar este la nivelul organelor genitale exteme, vaginului, anusului sau rectului, dar el poate s apar i la nivelul cavitii bucale sau al buzelor. Rata de contagiozitate este de 30%. n 40% dintre cazurile n care infecia este prezent la femeia gravid, se produc avort sau natere prematur. Dac nou nscutul infectat nu este tratat, acesta va dezvolta deficiene mentale, fizice sau de dezvoltare (Fig. 8). Simptomele apar la 8 + 1O sptmni dup natere. Fig. 8. Sifilis congenital</p> <p>I</p> <p>\</p> <p>Dei boala se poate trata cu Penicilin, rspndirea ei nu a putut fi oprit. Dintre mijloacele de prevenie recomandate fac parte: Abstinena A Sexul protejat A Testarea serologica la inceputul sarcinii pentru prevenirea sifilisului congenital. A Consult medical n caz de contact suspect, presupus expunere. Sifilisul este o maladie curabila, iar tratamentul nu este scump. Condiia este ca boala sa fie diagnosticat n primele zile i s se instituie tratament corect.A</p> <p>X.</p> <p>Diagnostic Sifilisul poate fi diagnosticat pe baza a 3 categorii de criterii: 1) Criteriul clinic: recunoasterea semnelor si simptomelor fiecarui stadiu</p> <p>\</p> <p>\</p> <p>2) Criteriul epidemiologic: conditii de contaminare 3) Criteriul de laborator: a. Examen microscopic al unei leziuni active pentru confirmarea diagnosticului b. Probe de sange pentru diagnostic serologie a. Diagnosticul direct Principiu Observarea la microscopul optic cu fond intunecat sau micro scopul cu fluorescenta a mobilitii i formei spiralate caracteristice Treponemei pallidum (Fig. 9). Fig. 9. Imagini la microscopul optic i la microscopul cu fluoarescen din prelevate pozitive pentru Treponema pallidum .</p> <p>Diagnosticul direct prezint o serie de avantaje, cum sunt simplitatea, rapiditatea, sensibilitatea de aproximativ 80%. Presupune ns o serie de condiii care un sunt ntotdeauna uor de realizat: personal experimentat pentru realizarea preparatelor ntre lam i lamel i observarea corect a lamelor, efectuarea testului inainte de introducerea tratamentului cu antibiotice i, mai ales disponibilitatea unor condiii de biosiguran corespunztoare la nivelullaboratorului. b. Diagnosticul indirect Principiu Determinarea prezenei sau titrului anticorpilor n snge sau LCR, ca rspuns la infecia treponemic Obiective: Depistarea sistematic i/sau ocazional a sifilisului Confirmarea sau excluderea unui diagnostic clinic sugestiv pentru sifilis Evaluarea caracterului evolutiv al infeciei Evaluarea rspunsului la tratament (vindecare, eec terapeutic) Detectarea unei recidive sau a unei reinfecii</p> <p>~ ~ ~ ~ ~</p> <p>Teste serologice Teste netreponemice VDRL (Venereal Disease Reference Laboratory) i RPR (Rapid Plasma Reagin)</p> <p>Sunt teste de aglutinare pasiv cu antigene cardiolipinice. De aceea sunt teste nespecifice. Reprezint variantele macro i microscopic a aceleiai metode. Se pozitiveaz din a 15-a zi de la apariia ancrului. Reactii fals pozitive: sarcina, infectii virale, la persoane care se drogheaz, boli de colagen, vrstnici. Utilizare: screen ing, monitorizarea tratamentului (nivelul de pozitivitate depinde de gradul de activitate al bolii). Dupa un tratament eficient, aceste teste se negativeaz de obicei, dar la o parte dintre indivizi se pot mentine pozitive la nivele joase Teste treponemice TPHA (Treponema pallidum Passive HaemAgglutination) Este un test de hemaglutinare pasiv, pozitiv n 65% din cazurile de sifilis 1 I 99% din cazurile de sifilis II. Detecteaza anticorpi prezeni att n infecii recente, ct i datorit unei infecii n antecedente cu Treponema pallidum sau alte specii de treponeme. Majoritatea indivizilor cu teste treponemice pozitive vor continua sa fie pozitivi pentru tot restul vietii, indiferent de tratament sau de activitatea bolii. FTA (Fluorescent Treponemal Antibody Test) Principiu Serul pacientului este depus pe o lama pe care sunt fixate treponeme. Prezena anticorpilor n ser, care reactioneaz cu antigenul treponemic este revelat prin adugarea unui conjugat Anticorpi anti Ig G uman - flurescein (Fig. 10) Fig. 10. Testul de fluorescen pentru detectarea anticorpilor treponemici n sifilis (FTA)</p> <p>Fixation des An t tc o rp ssur les</p> <p>tr</p> <p>ep</p> <p>o</p> <p>n</p> <p>e</p> <p>m</p> <p>e</p> <p>s</p> <p>,</p> <p>Fixation du c o n j n g u sur la p a r t l e Fc des 19.</p> <p>ede</p> <p>3</p> <p>Observation</p> <p>de</p> <p>Ilem Is s io n flu u r e s c e n c e,</p> <p>Testul este utilizat ca tehnic de confirmare. Se pozitiveaz n a 8-a zi de la apariia ancrului. Pentru eliminarea reaciilor fals pozitive datorate antigenelor de grup, se practic FTA - abs, adic o reacie de fluorescen pentru detectarea anticorpi lor treponemici n sifilis, n care serurile sunt absorbite in prealabil cu o suspensie de treponeme saprofite, nepatogene - ex. T Reiter - tulpina nepatogena de T phagadensis).</p> <p>FTA-Abs IgM este recomandat pentru confirmarea sifilisului congenital. Test Nelson (testul de imobilizare a treponemelor) Principiu Prezenta anticorpilor specifici este pus n eviden prin imobilizarea treponemelor vii, dup adugarea complementului i comparare cu un tub martor. Rezultatele calitative se exprim n procentaj de imobilizare specific: ~ O % - 20 % : Ser normal. ~ 20 % - 50 % : Ser nedeterminat ~ 50% - 100% : Ser pozitiv Este testul de referin, prezentnd o specificitate de 100%. n sifilisul tertiar, TPHA si FTA-Abs. sunt pozitive in 80% din cazuri, iar pentru diagnosticarea restului de 20% de cazuri se utilizeaz testul Nelson. Alte teste de diagnostic n sifilis Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) ~ Test imunoenzimatic ~ Antigene treponemice purificate sau recombinate ~ Locul in diagnosticul sifilisului incomplet stabilit Test de imunotransfer (Westem Blot) Principiu Proteinele T pallidum, separate prin electroforez, sunt transferate pe membrana de nitroceluloz, care se incubeaz cu serul. Apar benzi specifice de 15,5 ; 17 i 47 Kda. Testul Westem Blot poate constitui un bun test de diagnostic pentru sifilisul congenital, chiar mai sensibil i mai specific decat FTA Abs. Tratamentul sifilisului Penicilina vindec sifilisul care s-a instalat de mai puin de un an. Nu se recomanda tratamente fcute n afara prescripiei medicului. Testele serologice trebuie s verifice c infecia a fost eliminat. Sifilisul teri ar este incurabil, deoarece sunt instalate Ieziuni organice ireversibile.</p> <p>\</p> <p>Genul Leptospira 1. II. III. IV. V. VI. VII. VIII. IX. X. Minidefinitie Incadrare taxonomica Habitat Implicare in patologia umana Microbiologie - principalele caractere si implicatii in patogeneza si diagnosticul microbiologie Factori de patogenitate Patogenie Raspunsul imun Notiuni de epidemiologie si profilaxie Diagnostic</p> <p>Cuvinte cheie: spirochet, transmitere prin roztoare i animale domestice contaminate, icter, afeciuni tardive - uveit, atingere renal, diagnostic direct i serologie; reacie de aglutinare macroscopic (RAM) i microscopic 1. Minidefinitie</p> <p>Leptospirele sunt spirochete cu caractere speciale de patogenitate, care pot fi implicate n patologia uman, ca. urmare a contaminrii de la roztoare sau animale domestice. Pot determina o simptomatologie de gravitate variabil, care se manifest cu icter i complica...</p>